首页 > 新闻资讯

CHO细胞高密度瞬时转染



CHO细胞高密度瞬时转染



9ecbb9fcb58096728535f8d2abc261a.jpg

  Hi-KDCHO-K(K03205K)为珠海恺瑞自主开发的重组蛋白CHO细胞超高密度瞬转表达系统,与珠海恺瑞从CHO-K1细胞中所筛选驯化的CHOK1-Hi细胞配合使用可较大幅度提高重组蛋白的CHO细胞表达量。

  该系统包括CHO细胞超高密度培养液、转染试剂、蛋白表达增强剂以及植物蛋白胨营养添加剂。

01


瞬时转染

    1.将处于对数生长期的CHOK1-Hi细胞离心重悬至20×10^6个/ml的密度,震

  荡培养1小时后从培养箱中取出进行转染;

    2.转染时直接添加质粒至细胞培养中(按终浓度17ug/ml计算),充分摇匀

  后,再添加转染试剂(TA-CHO)(添加量按终浓度35ug/ml计算),充分混匀

  后将其放回培养箱中进行培养;

    3.在培养箱中培养5小时后,以体积为2:1的比例(2份Hi- KDCHO,1份转染

  细胞悬液)用Hi-KDCHO培养液将转染后的细胞稀释后,放回培养箱中培养。





02


产物表达与检测 

  

   1.转染24小时后加入细胞蛋白表达增强剂KE-CHO和营养补充剂KT-Feed,以

  增加产物表达量;

   2.待转染后的细胞生长至10×10^6个/ml时(一般为接种后的1~2天),需每

  天添加1g/L的葡萄糖,若细胞生长至20×10^6个/ml时(一般为接种后的4~6

  天),葡萄糖的添加量可加倍;

   3.转染后第5-7天测定产物表达量,客户可根据细胞状态及表达量选择适宜的收

  获时间。

原文链接:https://mp.weixin.qq.com/s/rshgPeqKajJwtgpPI1zIrw

更多信息请关注微信公众号:珠海恺瑞生物科技有限公司




上一篇:KOP293瞬时转染蛋白表达系统

下一篇:杂交瘤细胞无血清培养驯化


Copyright © 2021  珠海恺瑞生物科技有限公司 版权所有
English